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技術(shù)文章

如何平衡色譜柱？

閱讀：100發(fā)布時間：2024-10-31

平衡過程中，將流速緩慢地提高
用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑度如果較低，則需要較長的時間來平衡）

色譜柱的再生 　　進(jìn)行色譜柱再生時，應(yīng)使用一個謙價的泵，我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。
表1　建議用來沖洗的溶劑體積
色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積
125-4 1.6ml 30ml

250-4 3.2ml 60ml

 

250-10 -20ml 400ml

 


請根據(jù)下表選擇您的再生方法：

 


極性固定相（如Si，NH2＊，DIOL基色譜填料）的再生：

 


正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水＊＊

 


非極性固定相（如反相色譜填料RP－18，RP－8，CN等）的再生：

 


水→乙腈→氯仿（或異丙醇）→乙腈→水

 

0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱

注意：

 


在對NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液流出。

 


＊＊如果簡單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。

 

 


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